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發(fā)布日期:2022-05-30 點擊率:28
動力學(xué)分光光度法是利用反應(yīng)速率與反應(yīng)物,產(chǎn)物,催化劑濃度間的定量關(guān)系,通過測量吸光度對被測組分定量的一種方法。下面測定反應(yīng)體系中催化濃度為例,介紹動力學(xué)分光光度法的基本原理及測定方法。
設(shè)一個在催化劑(F)的作用下進(jìn)行的顯色反應(yīng):

若D為有色化合物,則D的生成速率(顯色反應(yīng)速率)可表示為:

在反應(yīng)進(jìn)行的初期,A,B的濃度較大,反應(yīng)小號的A和B可忽略不計,則可視為常數(shù):

由CF變化也很小,可視為常數(shù),上式積分得:

將上式代入朗伯比爾定率,有:

此式即為動力學(xué)分光光度法的基本關(guān)系式。
測定催化劑(F)的方法通常有固定時間法,固定濃度法和斜率法三種,固定時間發(fā)是讓反應(yīng)進(jìn)行一固定時間后終止,然后測量反應(yīng)體系的吸光度(A):

不同的催化劑濃度(cF)測得相應(yīng)反應(yīng)體系的A值,做出校準(zhǔn)曲線,然后由加入試樣的反應(yīng)體系的A值求出試樣中F的濃度。
固定濃度法是測量產(chǎn)物(D)達(dá)到一定濃度所需的時間,此時式中的CD為常數(shù),則:

同樣地可以作出
校準(zhǔn)曲線,由試樣體系的t值求出催化劑(F)的含量。
斜率法是根據(jù)吸收光度(A)隨反應(yīng)時間的變化速率來測定CFO根據(jù)關(guān)系
在不同的CD下測得A-t曲線,分別求出其斜率值。作出KCF-CF校準(zhǔn)曲線。斜率法的校準(zhǔn)曲線由更多的實驗數(shù)據(jù)獲得,因而其準(zhǔn)確度較高。
動力學(xué)分光度法具有靈敏度高,選擇性好,應(yīng)用范圍較廣等等特點,主要缺點是影響因素多,不宜嚴(yán)格控制,測定的誤差較大。
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