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    熒光分光光度計(jì)與紫外分光光度計(jì)屬一類(lèi)產(chǎn)品，結(jié)構(gòu)均由激發(fā)光源、單色器、樣品室、光電倍 增管和讀出（記錄）裝置所組成。但是它們光源是不同的，熒光分光光度計(jì)多采用高壓汞燈、氙燈和激光光源。同時(shí)，熒光測(cè)量多采用激發(fā)光和發(fā)射光成直角的光路，儀器組件的布置有所不同。
    下圖為某型號(hào)熒光分光光度計(jì)的光學(xué)系統(tǒng)圖，其主要工作原理是：當(dāng)光源光束經(jīng)入射單色器色散，提取所需波長(zhǎng)單色光照射于樣品上，由樣品發(fā)出的熒光經(jīng)發(fā) 射單色器色散后照射于光電倍增管，光電倍增管把熒光強(qiáng)度信號(hào)轉(zhuǎn)化成電信號(hào)并經(jīng)放器放大后記錄或讀出信號(hào)。

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    熒光分光光度計(jì)的光學(xué)系統(tǒng)圖

    1.氙燈（150W）；2.透鏡；3.光束分裂器；4.水平狹縫；5.激發(fā)單色器光柵；6.參考放電管；7.關(guān)閘；8.樣品室關(guān)閘；10.發(fā)射單色器光柵；12.光電倍增管
    (1)激發(fā)光源：要比吸收法中光源強(qiáng)度大。
    汞燈：發(fā)射強(qiáng)度大、穩(wěn)定，不需復(fù)雜電源，但譜線不連續(xù)，數(shù)目少，主要用于濾片熒光計(jì)。
    碘鎢燈：提供連續(xù)光譜300~700mn。
    氙燈：發(fā)出射線的強(qiáng)度大，譜線連續(xù)，分布于200~700 nm光域內(nèi)，且在300~400nm 波段內(nèi)射線強(qiáng)度幾乎相等，但該燈的電源功率要求大，且電源穩(wěn)定，因此電源結(jié)構(gòu)復(fù)雜。
    激光：發(fā)光強(qiáng)度大，能極大地提高熒光分析的靈敏度。
    (2)樣品池：通常由石英池（液體樣品用）或固體樣品架（粉末或片狀樣品）組成。測(cè)量液體時(shí)，光源與檢測(cè)器成直角安排；測(cè)量固體時(shí)，光源與檢測(cè)器成銳角安排。低溫?zé)晒鉁y(cè)定時(shí)在一樣品池外套一個(gè)液氮的透明石英真空瓶。
    (3)單色器：熒光分光計(jì)通常具有兩個(gè)濾光片：第一濾光片在光源與樣品池之間，濾去不需要的光，讓需要的激發(fā)光通過(guò)。第二濾光片在樣品池與檢測(cè)器之間，濾去溶劑散射 光、容器表面散射光、雜質(zhì)發(fā)出的光等，讓待測(cè)物質(zhì)發(fā)射的熒光通過(guò)。
    熒光分光光度計(jì)通常具有兩個(gè)光柵，位置同濾光片，單色性好。
    (4)檢測(cè)器：因熒光通常較弱，采用光電倍增管作檢測(cè)器，靈敏度高。選擇光電倍增管要考慮：響應(yīng)波長(zhǎng)、靈敏度和嗓聲水平。 藍(lán)敏管對(duì)蛋白質(zhì)、核酸的測(cè)量適用，而紅敏管則適用于熒光染料檢測(cè)。
    (5)顯示系統(tǒng)：光度表、計(jì)算機(jī)操作系統(tǒng)等。
    補(bǔ)充說(shuō)明：與紫外分光光度計(jì)的結(jié)構(gòu)區(qū)別：
    1.熒光分光光度計(jì)采用的是垂直的測(cè)量方式，以消除透射光的影響。
    2.檢測(cè)器前面有無(wú)單色器，熒光分光光度計(jì)有兩個(gè)單色器又上圖可以看出，能夠獲得單色性較好的激發(fā)光并消除其他雜散光干擾。

     正確了解熒光分光光度計(jì)的結(jié)構(gòu)，也是能夠幫助我們更好使用和操作，一定要仔細(xì)閱讀哈~

標(biāo)簽:                                    熒光分光光度計(jì)